多片段无缝克隆设计工具 V1.0

🧬 多片段无缝克隆设计工具

Version: V1.0 | Author: Cinda

5' 端酶切位点 (Left)

3' 端酶切位点 (Right)

保留酶切位点序列在载体上

载体序列 (Vector Edge)

📌 载体上游序列 (Upstream / 5' Left)

📌 载体下游序列 (Downstream / 3' Right)

插入片段序列 (Fragments)

同源臂: bp 目标 Tm: ℃ Na+: mM Mg2+: mM 引物浓度: nM

🗺️ 质粒组装图谱 (Plasmid Map)

引物清单

目标片段	方向	序列 (5'->3')	Tm	操作

载体用量: ng 片段:载体 (摩尔比): : 1 体系总体积: μL

组分	长度 (bp)	浓度 (ng/μL)	加入体积 (μL)	摩尔数 (pmol)
线性化载体			-	-
💧 补水 (ddH₂O) 至总体积:			-

* 计算公式: Mass(frag) = Mass(vec) × [Len(frag)/Len(vec)] × Ratio